产品简介
琼脂糖提取自琼脂或者含琼脂的海藻,是一种多聚物,基本结构是由1,3连结的β-D-半乳呋喃糖和1,4连结的3,6-脱水-α-L-半乳呋喃糖相间联结而成的线性多糖。琼脂糖具有亲水性,并几乎不存在带电基团,对敏感的生物大分子极少引起变性和吸附,是理想的惰性载体。
琼脂糖在低浓度时即具有较高凝胶强度,在水中一般加热到90℃以上溶解,温度下降到35-40℃液体形成良好的半固体近透明状的凝胶,这是它具有多种用途的主要特征和基础。HyAgarose公司的琼脂糖采用绿色环保原创工艺,生产全程不使用有机溶剂,减少对环境污染,减少对操作者和样品影响。适用于DNA/RNA凝胶电泳。
产品用途
低电渗琼脂糖适用于所有核酸相关分子生物学实验,包括核酸提取,PCR实验,基因检测与分型,测序与基因合成,文库构建,基因克隆,胶回收等。
产品特性
高分辨率、低背景、高强度凝胶、加快条带移动速率、品质稳定
质量指标
CAS 9012-36-6
外观 白色粉末
EEO ≤ 0.13
凝胶温度 36℃±1.5℃ (1.5% gel)
融胶温度 88℃±1.5℃ (1.5% gel)
溶解性 无色清澈胶液
水分 ≤10%凝胶强度 ≥1200 g/cm2 (1% gel)
硫化物(SO42-) ≤ 0.15%
灰分 ≤ 0.5%
DNA酶& RNA酶 不得检出
蛋白酶 不得检出
核酸内切酶 不得检出使用方法:
使用浓度:根据所要分离的核酸分子量不同配制不同浓度。
琼脂糖浓度%
0.3
0.6
0.7
0.9
1.2
1.5
2.0
线性DNA大小(kb)
60-5
20-1
10-0.8
7-0.5
6-0.4
4-0.2
3-0.1
常用的电泳缓冲液:TAE(Tris-乙酸)、TBE(Tris-硼酸)、TPE(Tris-磷酸)
琼脂糖凝胶电泳常见问题
1.微波炉加热时胶液沸腾,冲出三角瓶
解决办法:
1)总液体量不宜超过三角锥瓶的50%容量;
2)胶液浓度为2%以上的请设置中火加热;
3)胶液剧烈沸腾时,停止加热,移开三角锥瓶,请戴上防热手套,小心摇动三角锥瓶,然后再次加热,胶液沸腾直至胶液清澈,保证琼脂糖完全溶解。
2.琼脂糖电泳图像背景模糊不清
解决办法:琼脂糖没有完全溶解会造成电泳图像背景模糊不清。完全溶解的琼脂糖胶液清澈,三角锥瓶内壁应没有粘附琼脂糖颗粒。
3.DNA条带模糊、拖尾
解决办法:
1)DNA降解。避免核酸酶污染。
2)DNA上样量过多。减少凝胶中DNA上样量。
3)电泳缓冲液陈旧:电泳缓冲液多次使用后,离子强度降低,pH 值上升,缓冲能力减弱,从而影响电泳效果。建议经常更换电泳缓冲液。
4)电泳条件不合适。电泳时电压不应超过20V/cm,温度<30℃,巨大DNA链,温度应<15℃,核查所用电泳缓冲液是否有足够的缓冲能力。
5)DNA样含盐过高。泳前通过乙醇沉淀去除过多的盐。
6)有蛋白污染。电泳前抽提去除蛋白。
7)DNA变性。电泳前勿加热,用20mM NaCl缓冲液稀释DNA。
4.DNA条带淡弱或无DNA带
解决办法:
1) DNA的上样量不够:增加DNA的上样量。
2) DNA降解:避免DNA的核酸酶污染。
3) DNA跑出凝胶:缩短电泳时间,降低电压,增强凝胶浓度。
4) 分子大小相近的DNA带不易分辨。增加电泳时间,使用正确的凝 胶浓度。
5) DNA 变性:电泳前请勿高温加热DNA链,用20mM NaCl Buffer 稀释DNA。
6) DNA链巨大,常规凝胶电泳不合适。应在脉冲凝胶电泳上分析。5.DNA Marker条带扭曲
解决办法:1)配制凝胶的缓冲液和电泳缓冲液不是同时配制的。使用同时配制的缓冲液。电泳时缓冲液高过液面1-2mm即可。2)电泳时电压过高。可以在电泳前15分钟用较低电压(3V/cm),等条带出孔后,再调电压。
3)尽量慢慢加样,等样品自然沉降后再加电压
保存:室温,干燥保存
官网链接:http://www.sunmabio.com/lec111.htm
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备注:本公司所有产品仅限科研使用
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